Forschung / Analysezertifikat lesen
Analytik-Leitfaden

Analysezertifikat (COA) für Peptide lesen: HPLC, Massenspektrometrie und Chargenprüfung

Einordnung. Dieser Artikel fasst veröffentlichte Laborliteratur für Leser zusammen, die mit der Verbindung als Forschungsreagenz arbeiten. Er enthält keine Dosierungs-, Anwendungs- oder Gebrauchshinweise, und nichts hier ist eine Aussage über eine Anwendung an Menschen oder Tieren. Dieser Leitfaden beschreibt die Qualitätsprüfung von Forschungsmaterial und ist keine Aussage zu irgendeiner Anwendung.

Die fünf Prüfschritte

  1. Chargennummer. Sie muss mit der Nummer auf Fläschchen und Verpackung übereinstimmen.
  2. HPLC-Reinheit mit Chromatogramm. Nicht nur die Prozentzahl lesen, sondern das Chromatogramm ansehen.
  3. Massenspektrometrie. Die gemessene Masse muss zur berechneten Masse der Verbindung passen.
  4. Gemessener Gehalt. Menge in mg pro Fläschchen, nicht nur ein Reinheitswert.
  5. Unabhängige Verifizierung. Der Prüfschlüssel des Berichts lässt sich auf der Webseite des Labors selbst eingeben.

HPLC-Reinheit

Die Reinheit ist die Fläche des Hauptpeaks als Prozentsatz aller integrierten Peaks, meist per UV-Detektion bei 214 oder 220 nm. Achten Sie auf einen scharfen Hauptpeak, eine ruhige Basislinie und darauf, ob kleine Verunreinigungspeaks integriert oder ignoriert wurden. Die Reinheit sagt nichts darüber aus, ob der Hauptpeak das richtige Molekül ist. Bei lipidierten Peptiden kann der Peak auf Umkehrphasen-Säulen breiter erscheinen, deshalb lohnt der Blick auf die Peakform.

Massenspektrometrie und Identität

Die Identität ergibt sich aus der gemessenen Masse. Bei der Elektrospray-Ionisation ist das einfach protonierte Ion [M+H]+ das übliche Signal; bei größeren Peptiden treten mehrfach geladene Ionen auf ([M+2H]2+, [M+3H]3+), und das Programm des Labors berechnet daraus die entfaltete Gesamtmasse. Diese muss zur erwarteten Masse der Verbindung passen. Bei lipidierten Peptiden zählt die Masse des Gesamtmoleküls inklusive Fettsäure, nicht die der nackten Aminosäurekette. Ein sauberes HPLC-Ergebnis ohne passende Masse beweist nicht, dass das richtige Molekül vorliegt.

Peptidgehalt und Reinheit

Lyophilisierte Peptide enthalten Gegenionen und Restwasser. Der tatsächliche Peptidanteil im Fläschchen (Nettopeptidgehalt) liegt daher unter dem HPLC-Reinheitswert. Ein COA, das die gemessene Menge pro Fläschchen angibt, beantwortet eine andere Frage als eines, das nur die Reinheit nennt. Steht dort nur ein Reinheitsprozentwert, ist die beschriftete Menge nicht belegt.

Rückverfolgbarkeit und Verifizierung

  • Die Chargennummer auf dem Bericht muss zu Fläschchen und Verpackung passen.
  • Das testende Labor sollte vom Verkäufer unabhängig sein.
  • Ein Prüfschlüssel oder eine URL auf der Seite des Labors zeigt, dass der Bericht nicht bearbeitet wurde. Prüfen Sie ihn, verlassen Sie sich nicht allein auf ein PDF-Bild.
  • Das Prüfdatum sollte plausibel vor dem Verkauf der Charge liegen.

Null Bio Lab veröffentlicht unabhängige Berichte mit Verifizierungslink auf der COA-Seite.

Warnsignale

  • Ein Reinheitswert ohne Chromatogramm.
  • Keine Massendaten oder eine gemessene Masse, die nicht zur berechneten passt.
  • Ein Bericht nur aus dem „hauseigenen“ Labor des Verkäufers.
  • Eine Chargennummer auf dem COA, die vom Fläschchen abweicht.
  • Runde Zahlen, die sich bei verschiedenen Verbindungen wiederholen.

Häufige Fragen

Was gehört in ein Peptid-COA?

HPLC-Reinheit mit Chromatogramm, eine gemessene Masse, die zum berechneten Wert passt, die gemessene Menge, eine Chargennummer wie auf dem Fläschchen und ein Prüfschlüssel auf der Seite des unabhängigen Labors.

Reicht die HPLC-Reinheit?

Nein. Sie sagt, wie viel des Signals auf einen Peak entfällt, nicht dass der Peak das richtige Molekül ist. Für die Identität braucht man ein Massenspektrometrie-Ergebnis.

Warum ist der Peptidgehalt niedriger als die Reinheit?

Lyophilisiertes Peptid enthält Gegenionen und Restwasser. Der Peptidanteil im Fläschchen liegt deshalb unter dem HPLC-Wert.

Wie verifiziere ich einen Bericht?

Geben Sie den Schlüssel des Berichts auf der Verifizierungsseite des unabhängigen Labors selbst ein, statt sich auf ein PDF-Bild zu verlassen.

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Neu veröffentlichte Studien zu diesem und anderen Peptiden finden Sie im Live-Feed des Research Desk.